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生物化学基本技术--离心技术

时间:2016-06-23 16:54:53  来源:  作者:

  离心技术(centrifugal technique)是根据颗粒在作匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为而发展起来的一种分离技术。这项技术在临床生物化学中常用来分离化学反应后的沉淀物,和收集生物大分子物质。nyT网赌ag有现场台子|平台

  (一)离心技术的分类nyT网赌ag有现场台子|平台

  根据离心原理和工作的需要,目前已设计出许多离心方法,综合起来大致可分三类:①平衡离心法:根据粒子大小、形状不同进行分离,包括差速离心法(differential velocity centrifugation)和速率区带离心法(rate zonal centrifugation);②等密度离心法(isodensity centrifugation):又称等比重离心法,依粒子密度差进行分离;③经典式沉降平衡离心法:用于生物大分子分子量的测定、纯度估计、构象变化等。nyT网赌ag有现场台子|平台

  依据离心机转头的旋转速度,可将离心机分为低速离心(4000r/min以内),高速离心(20000r/min,最大相对离心率可达45000g)和超速离心(30000r/min以上,最大相对离心力达645000g)三种类型。nyT网赌ag有现场台子|平台

  按照离心技术的实际应用,可将离子技术分为普通离心、专用离心、制备性离心和分析性离心四大类。nyT网赌ag有现场台子|平台

  (二)各类型离心机的特点和应用nyT网赌ag有现场台子|平台

  1.低速离心机 根据处理样品的容量大小,可分为:锥型台式、水平型桶式、大容量立式三种。前者主要用于实验室样品的初级分离,在日常检测中的应用最广。后两种主要用于大量生物制备和血站分离血浆等。nyT网赌ag有现场台子|平台

  2.高速离心机 由于运转速度快,一般适用于各种生物细胞、病毒、血浆蛋白质等分离。也可应用于有机物、无机物溶液,悬液及胶体溶液中有形成份的浓缩、提取、制备等工作,是细胞生物学和分子生物学研究的重要工具。nyT网赌ag有现场台子|平台

  3.超速离心机 可分为制备和分析两种类型。nyT网赌ag有现场台子|平台

  (1)制备型超速离心机:最高转速可达55000~90000r/min,可配密度梯度收集仪,密度梯度泵,各种加样、取样器等附件,整机自动化程度高,功能齐全。是医学检验、生物化学学和分子生物学领域的重要工具,可用于细胞器、病毒的分离和浓缩。nyT网赌ag有现场台子|平台

  (2)分析型超速离心机:大多装有特殊设计的转头和控制系统,可直接观察了解分析样品的沉降情况。利用特殊配备的数据处理系统,可自动计算出分离物质的沉降系数和分子量。它主要用于测定生物大分子的分子量和沉降系数,估价样品的纯度等。nyT网赌ag有现场台子|平台


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